作者：邢亮
來源：醫學界腫瘤頻道
病理學是用自然科學的方法研究疾病的形態結構、代謝和功能等方面的改變，從而揭示疾病的病因、發病機制和轉歸的醫學基礎學科。組織切片、HE染色、顯微鏡觀察是病理學的主要檢查方法。
20世紀60年代的電子顯微鏡技術的建立，使病理學研究進入到亞細胞水平，對疾病的研究從器官、組織、細胞和亞細胞水平深入到分子及基因水平，并使形態學觀察和研究從定位、定性走向定量。對于疾病的性質和病理分型有了更加準確的方法，更加有利于臨床治療和靶向藥物的應用。
現在，我們就簡述一下現代病理學的新技術。
1.組織化學
組織化學染色技術即一般所說的特殊染色。可以應用特殊的染色劑定位，顯示出組織和細胞的特殊化學成分，對一些代謝性疾病的診斷有一定的參考價值。
例如戈謝病，可以用特殊染色顯示出在脾臟和肝臟內堆積的葡萄糖腦苷脂。PAS染色可區別骨Ewing肉瘤和惡性淋巴瘤。PTAH染色可顯示橫紋肌肉瘤中瘤細胞胞質內的橫紋。
2.免疫組織化學
免疫組織化學是利用抗原-抗體的特異性結合反應原理，以抗原或抗體來檢測和定位組織中的待測物質。按標記物的性質可分為熒光法（熒光素標記）、酶法（辣根過氧化物酶、堿性磷酸酶等）、免疫金銀及鐵標記技術。
隨著大量商品化的單克隆和多克隆抗體出現、配套試劑盒的使用及方法學的不斷完善，免疫組織化學染色已經成為病理診斷和研究中必不可少的技術手段之一，被廣泛應用于各種蛋白質或肽類物質表達水平的檢測、細胞起源于分化的判定、淋巴細胞的免疫表型分析、細胞增值、細胞周期和信號傳導等研究。
3.原位雜交技術
用標記了已知序列的核苷酸片段作為探針，通過雜交直接在組織切片、細胞涂片或培養細胞爬片上檢測和定位某一特定的靶DNA或RNA的存在。如熒光原位雜交（FISH）對Her-2基因擴增進行檢測，可以彌補免疫組織化學檢測結果的不穩定。
4.原位多聚酶鏈式反應技術（PCR）
在體外經酶促反應將某一特定DNA序列進行高效、快速擴增，可以將單一拷貝或低拷貝的待檢測核酸以指數的形式擴增而達到常規方法可檢測的水平。是一種可以在冷凍或石蠟包埋組織切片、細胞涂片或培養細胞爬片上來檢測和定位核酸的技術。可用于EB病毒、人乳頭狀瘤病毒、肝炎病毒、巨細胞病毒和人免疫缺陷病毒基因組及結核、麻風桿菌基因的檢測。
5.顯微切割術
20世紀90年代初發展起來的一門新技術，可以從組織切片、細胞涂片上任一區域內切割下幾百個、幾十個同類細胞，或單個細胞甚至目標染色體，再進行有關的分子生物學方面的研究。比如可用CD15、CD30單克隆抗體染色切割霍奇金淋巴瘤組織切片上的R-S細胞。
6.激光掃描共聚焦顯微術
采用激光作為光源，在傳統光學顯微鏡基礎上采用共軛聚焦原理和裝置，并利用計算機對所觀測的對象進行數字圖像處理的一套觀察、分析和輸出系統。可以對樣品進行無損傷地斷層掃描和成像，以觀察、分析細胞的三維空間結構，與其他技術相結合還可實現活細胞的動態觀察、多重免疫熒光標記或離子熒光標記，研究活細胞功能與代謝過程。
7.流式細胞學（FCM）
一種可以對細胞或亞細胞結構進行快速測量的新型分析技術與分選技術。在定性、定量分析的基礎上，可以將不同的細胞或微粒亞群分選出來，經收集進一步培養或觀測。可以分析細胞周期、分析細胞的增殖與凋亡、分析細胞分化及鑒別良惡性腫瘤、分選細胞或微粒、分析藥物在細胞中的含量、分布及作用機制。
8.比較基因組雜交
通過單一的一次雜交可對某一腫瘤整個基因組染色體拷貝數量的變化進行檢查。如對肺的小細胞癌的原發癌和淋巴結轉移癌細胞的檢測，可發現二者為單一克隆關系。
9.細胞生物芯片技術
是利用微點陳技術將多種生物探針高密度地固定在固相基質上，達到一次實驗同時檢測多種疾病或分析多個生物樣本的目的。對于科研、開發、疾病的分子診斷、預后分析、藥物治療靶點的篩選、組織分布、細胞定位、抗藥體和新藥的篩選等方面均具有十分廣泛的實用價值。
10.動物活體成像技術
應用影像學方法，對活體狀態下的生物過程進行的細胞和分子水平的定性和定量研究。主要分為光學成像、核素成像、磁共振成像、超聲成像及CT成像五大類。可以觀察活體動物體內腫瘤的生長及轉移、感染性疾病發展過程、特定基因的表達等生物學過程。
11.圖像分析技術
利用圖像分析儀或圖像分析系統解決“如何客觀而精確地用數字來表達存在于標本中的各種形態學與含量為主的信息”的問題。可以用于細胞核形態參數的測定（如直徑、周長、面積、體積等）、DNA倍體的測定和顯色反應（如免疫組化）的定量，甚至輔助腫瘤的組織病理學分級和預后判斷等。
12.體視學技術
維形態定量特征的方法。可以用三維定量數據來表達特征結構信息。
13.電子顯微鏡技術
利用電子顯微鏡觀察經特殊制備的樣本微細結構與形態的技術。在臨床上可用于多種疾病亞細胞結構病變的觀察和診斷，特別是腎小球疾病和肌病的診斷，以及一些疑難腫瘤的組織來源和細胞屬性判定，如一些去分化、低分化或多向分化腫瘤的診斷和鑒別診斷。
以上就是近幾年病理學常用的診斷技術。這些技術有的主要用于特殊實驗室，有的已經配備于基層病理科，提高了診斷的準確性和精密性，使病理學從細胞水平進入到亞細胞和分子水平。為臨床提供了更準確和更有價值的資料，使腫瘤的分子靶向藥物打的更準、作用更直接。
而所有的這一切都得益于越來越先進的診療技術，所謂魔高一尺，道高一丈，相信在不遠的將來，會有更加先進的技術，讓我們拭目以待吧！
